Fizjologia_bakterii.pdf

(329 KB) Pobierz

Ćwiczenie 2

Temat: Fizjologia bakterii

Demonstracja i omówienie:

1. Podłoża bakteriologiczne wykorzystywane w rutynowym badaniu mikrobiologicznym.

2. Posiew izolacyjny na podłoże stałe i posiew na podłoże płynne.

CZĘŚĆ PRAKTYCZNA

Zadanie 1. Wykonanie posiewu izolacyjnego bakterii na podłożu stałym

Cel: Zapoznanie się z technikami izolacji drobnoustrojów w laboratoriach mikrobiologicznych

Wykonanie: w grupach 2-osobowych (dotyczy zadań 1A, 1B) i 6-osobowych (1C)

Posiew izolacyjny bakterii

1) Pobrać jałową ezą bakterie (1 oczko ezy)

2) Nanosić bakterie na podłoże według załączonego schematu

Uwaga! W sektorach B, C i D wykonywać posiewy wyłącznie jałową, ostudzoną ezą!

3)

Po wykonaniu zadania opalić ezę nad płomieniem palnika i odłożyć do statywu

Schemat:

Opal ezę

Obróć płytkę o 90°

Opal

ezę

Obróć płytkę o 90°

Obróć płytkę o 90°

1

1142726219.048.png

1142726219.059.png

1142726219.070.png

1142726219.074.png

1A. Cel : Badanie wymagań odżywczych bakterii

Wykonanie: w grupach 2-osobowych (każda grupa wykonuje posiew izolacyjny 1 hodowli

bakteryjnej)

Materiał :

24-48 godz. hodowle drobnoustrojów na podłożu krwawym ( Streptococcus sp.,

Neisseriae sp., Staphylococcus sp., Corynebacterium sp., Escherichia sp., Bacillus sp. )

płytki z podłożem wzbogaconym (agar krwawy)

płytki z podłożem zwykłym (agar mięsny)

cieplarka na temp. 37°C

Badanie wymagań odżywczych bakterii

1) Wykonać posiew izolacyjny bakterii na podłoże zwykłe i podłoże wzbogacone

2) Płytki inkubować w cieplarce w 37°C przez 24-48 godzin

ODCZYTANIE WYNIKÓW NA NASTĘPNYCH ĆWICZENIACH!

3) Po inkubacji odczytać wynik:

porównać intensywność wzrostu bakterii na badanych podłożach

określić, która grupa drobnoustrojów ma większe wymagania odżywcze

Wyniki:

Tabela 1A

Wzrost

(- , +, ++, +++)

Interpretacja wyników

(drobnoustrój

wymagający/niewymagający)

Bakterie

podłoże

zwykłe

podłoże

wzbogacone

Streptococcus sp.

Neisseriae sp.

Staphylococcus sp.

Corynebacterium sp.

Escherichia sp.

Bacillus sp.

2

1142726219.001.png

1142726219.002.png

1142726219.003.png

1142726219.004.png

1142726219.005.png

1142726219.006.png

1142726219.007.png

1142726219.008.png

1142726219.009.png

1142726219.010.png

1142726219.011.png

1142726219.012.png

1142726219.013.png

1142726219.014.png

1142726219.015.png

1142726219.016.png

1142726219.017.png

1142726219.018.png

1142726219.019.png

1B. Cel : Badanie wymagań tlenowych bakterii

Wykonanie: w grupach 2-osobowych (każda grupa otrzymuje 1 drobnoustrój)

Materiał :

24-48 godz. hodowle drobnoustrojów na agarze mięsnym: Pseudomonas sp., Escherichia

sp., Micrococcus sp., Serratia sp., Klebsiella sp., Enterococcus sp.

2 płytki z podłożem zwykłym (agar mięsny)

cieplarka na temp. 37°C

Badanie wymagań tlenowych bakterii

1) Wykonać posiew izolacyjny bakterii na 2 podłoża

2) Jedną płytkę inkubować w warunkach beztlenowych (anaerostat), drugą płytkę

inkubować w warunkach tlenowych.

3) Inkubować podłoża w 37°C przez 24-48 godzin

ODCZYTANIE WYNIKÓW NA NASTĘPNYCH ĆWICZENIACH!

4) Odczytać wynik po inkubacji i zapisać w tabeli 1B.

Wyniki :

Tabela 1B

Wzrost

(- , +)

Określić grupę

Bakterie

warunki

tlenowe

warunki

beztlenowe

drobnoustrojów*

Pseudomonas sp.

Escherichia sp.

Micrococcus sp.

Serratia sp.

Klebsiella sp.

Enterococcus sp.

* bezwzględne tlenowce, bezwzględne beztlenowce, względne beztlenowce

3

1142726219.020.png

1142726219.021.png

1142726219.022.png

1142726219.023.png

1142726219.024.png

1142726219.025.png

1142726219.026.png

1142726219.027.png

1142726219.028.png

1142726219.029.png

1142726219.030.png

1142726219.031.png

1142726219.032.png

1142726219.033.png

1142726219.034.png

1142726219.035.png

1C. Cel: Różnicowanie i wstępna identyfikacja bakterii za pomocą podłoży wybiórczo-

różnicujących

Wykonanie: w grupach 6-osobowych (grupa wykonuje posiew 1 mieszaniny na 3 podłożach)

Materiał :

Mieszanina 2 rodzajów bakterii w fizjologicznym roztworze soli

Płytki z podłożem wzbogaconym (agar krwawy)

Płytki z podłożem wybiórczo-różnicującym (Mac Conkey’a)

Płytki z podłożem wybiórczo-różnicującym (Chapmana)

cieplarka na temp. 37°C

Różnicowanie i wstępna identyfikacja bakterii za pomocą podłoży

wybiórczo-różnicujących

1)

Wykonać posiew izolacyjny mieszaniny bakteryjnej na podłoże wzbogacone

i 2 podłoża wybiórczo-różnicujące

2) Inkubować podłoża w 37°C przez 24-48 godzin

ODCZYTANIE WYNIKÓW NA NASTĘPNYCH ĆWICZENIACH!

3) Po inkubacji odczytać wynik i zapisać w tabeli 1C:

ocenić intensywność wzrostu każdego rodzaju bakterii na podłożu wzbogaconym

wykonać preparaty barwione metodą Grama: z obydwu rodzajów kolonii wyrosłych

na podłożu krwawym i z kolonii wyrosłych na podłożach wybiórczo-różnicujących

Wyniki:

Tabela 1C

Podłoża / (wzrost: -, +, ++, +++)

Preparat Grama

Mieszanina

Agar

krwawy

Mac

Conke’y*

Barwa

Kształt

Bakteria

Chapman’a**

1

A

2

1

B

2

* barwa kolonii różowa lub barwa kolonii bez zmian

** barwa kolonii i podłoża żółta, podłoże bez zmian, z koloniami barwy białej

4

1142726219.036.png

1142726219.037.png

1142726219.038.png

1142726219.039.png

1142726219.040.png

1142726219.041.png

1142726219.042.png

1142726219.043.png

1142726219.044.png

1142726219.045.png

1142726219.046.png

1142726219.047.png

1142726219.049.png

1142726219.050.png

1142726219.051.png

1142726219.052.png

1142726219.053.png

1142726219.054.png

1142726219.055.png

1142726219.056.png

1142726219.057.png

1142726219.058.png

Zadanie 2 . Wykonanie posiewu bakterii na podłoże płynne

Cel: Zapoznanie się z technikami hodowli drobnoustrojów w laboratoriach mikrobiologicznych

Wykonanie: w grupach 2-osobowych (każda grupa posiewa 1 drobnoustrój na podłoże

płynne)

Materiał :

24-48 godz. hodowle drobnoustrojów (z zadania 1B)

podłoże płynne (bulion z glukozą)

cieplarka na temp. 37°C

Wykonanie posiewu bakterii na podłoże płynne

1) Pobrać jałową ezą bakterie (1oczko ezy)

2) Trzymając ezę w jednej ręce, drugą pobrać ze statywu probówkę z podłożem płynnym

3) Piątym palcem ręki w której trzymamy ezę, wyjąć korek z probówki

4) Delikatnie opalić wlot probówki nad płomieniem palnika

5) Wprowadzić bakterie do probówki z podłożem, delikatnie rozcierając zawartość ezy na

ściankach wnętrza probówki, tuż nad powierzchnią podłoża

6) Wymieszać podłoże, delikatnie opalić wlot probówki i po jej zamknięciu odstawić do

statywu

7) Ezę wyżarzyć nad płomieniem palnika i włożyć do statywu

8) Inkubować podłoże w 37°C przez 24-48 godzin

ODCZYTANIE WYNIKÓW NA NASTĘPNYCH ĆWICZENIACH!

9) Odczytać wynik i zapisać w tabeli 2.

Wyniki:

Tabela 2

Hodowla

Wzrost (+, -)

A

B

C

D

E

F

5

1142726219.060.png

1142726219.061.png

1142726219.062.png

1142726219.063.png

1142726219.064.png

1142726219.065.png

1142726219.066.png

1142726219.067.png

1142726219.068.png

1142726219.069.png

1142726219.071.png

1142726219.072.png

1142726219.073.png

Plik z chomika:

Inne pliki z tego folderu:

Mikrobiologia i Parazytologia do 2014 Giełdy, Materiały Egzamin.rar (28508 KB)
Gatka - skrypt.pdf (1137 KB)
MIKRO.docx (202 KB)
Notatki.docx (40 KB)
Przewodnik antybiotykoterapii 2013.pdf (68780 KB)

Inne foldery tego chomika:

Zgłoś jeśli naruszono regulamin